穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建
高表達(dá)量穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建
與瞬時(shí)轉(zhuǎn)染不同,穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建是指外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞并整合到細(xì)胞的染色體上,使宿主細(xì)胞可長(zhǎng)期表達(dá)目的基因。穩(wěn)定細(xì)胞株有諸多用途,如蛋白抗體生產(chǎn)、信號(hào)傳導(dǎo)、藥物靶點(diǎn)研究,免疫治療藥物開(kāi)發(fā)等,其表達(dá)的蛋白/抗體穩(wěn)定性更好和批次差異性更小。
博梵生命提供高表達(dá)哺乳動(dòng)物穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù),篩選過(guò)程使用先進(jìn)的單克隆細(xì)胞篩選平臺(tái),較傳統(tǒng)篩選流程快近80天,大大縮短了穩(wěn)定細(xì)胞株的開(kāi)發(fā)周期。
服務(wù)流程
基因合成——1周
密碼子優(yōu)化
基因合成
載體構(gòu)建
質(zhì)粒制備
細(xì)胞轉(zhuǎn)染——1周
細(xì)胞轉(zhuǎn)染條件優(yōu)化
表達(dá)檢測(cè)
WB或ELISA
穩(wěn)定細(xì)胞系篩選——2∼4周
On-chip篩選
壓力篩選
穩(wěn)定性評(píng)估
細(xì)胞凍存
交付
優(yōu)選2株穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株
質(zhì)檢報(bào)告(CoA)
測(cè)序報(bào)告.
穩(wěn)定細(xì)胞株篩選(研究級(jí))
我們可以在任何細(xì)胞的基因組上插入您感興趣的基因,并篩選穩(wěn)定整合的單克隆細(xì)胞株。其可應(yīng)用于多種研究領(lǐng)域,如信號(hào)傳導(dǎo),藥物靶點(diǎn)研究,免疫治療藥物開(kāi)發(fā)等。博梵生命已經(jīng)在數(shù)十種細(xì)胞中成功構(gòu)建細(xì)胞系。您只需提供基因序列,我們按照要求完成細(xì)胞株的篩選。
服務(wù)優(yōu)勢(shì)
快速交付,2~3個(gè)月,交付穩(wěn)定細(xì)胞株;
細(xì)胞來(lái)源清晰,干凈無(wú)污染;
經(jīng)驗(yàn)豐富,具備豐富的細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn),熟悉各類細(xì)胞的培養(yǎng)方法;
服務(wù)說(shuō)明
1.客戶提供:需提供目的基因序列和宿主細(xì)胞(若非常見(jiàn)細(xì)胞),并附詳細(xì)的細(xì)胞培養(yǎng)流程;
2.鑒定方法:我們免費(fèi)提供gPCR鑒定。同時(shí)也可提供Western Blot、ELISA等其他鑒定方法(須另外付費(fèi));
CRISPR基因敲除-基因編輯服務(wù)
博梵生命提供CRISPR/Cas9基因敲除服務(wù),能夠準(zhǔn)確的敲除指定的基因。與傳統(tǒng)的TALEN(轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)物核酸酶)以及ZNF(鋅指核酸酶)技術(shù)相比,CRISPR技術(shù)能夠低成本地實(shí)現(xiàn)高效靈活的基因敲除。您只需提供目的基因序列和細(xì)胞,我們就能為您提供高性價(jià)比的基因敲除服務(wù),并且定期提供進(jìn)度報(bào)告,服務(wù)全程的透明化,讓您放心無(wú)憂。
服務(wù)優(yōu)勢(shì)
高成功率,低脫靶率:多組gRNA設(shè)計(jì)和驗(yàn)證,提供脫靶分析和檢測(cè)服務(wù);
快速交付,全程透明:~3月交付基因敲除細(xì)胞株,定期匯報(bào)實(shí)驗(yàn)進(jìn)度,實(shí)驗(yàn)全程透明化;
一站式服務(wù):博梵生命專注于基因和重組蛋白研究,能夠提供從gRNA設(shè)計(jì)到蛋白質(zhì)檢測(cè)(可選)全過(guò)程的實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
客戶須知:
需提供目的基因序列或序列號(hào),若非常見(jiàn)細(xì)胞,則需要提供對(duì)應(yīng)的宿主細(xì)胞和培養(yǎng)流程;
我們免費(fèi)提供目的基因測(cè)序鑒定,同時(shí)也能夠根據(jù)客戶要求提供Western Blot,脫靶測(cè)序鑒定等其他檢測(cè)服務(wù)(需另外收費(fèi))。
服務(wù)流程
步驟 |
項(xiàng)目評(píng)估 |
Phasel:gRNA載體構(gòu)建 |
Phase Ⅱ:單克隆細(xì)胞株篩選 |
流程 |
•細(xì)胞分型 •目的基因序列分析 •gRNA靶位點(diǎn)確定 |
•gRNA序列設(shè)計(jì) (同時(shí)設(shè)計(jì)3~5組) •gRNA載體構(gòu)建 •gRNA靶點(diǎn)活性檢測(cè) |
•單克隆細(xì)胞篩選•擴(kuò)大培養(yǎng) •測(cè)序鑒定 •陽(yáng)性克隆凍存 |
周期 |
無(wú) |
~2周 |
~10-14周 |
交付 |
無(wú) |
•gRNA序列 |
•單克隆細(xì)胞株 •測(cè)序檢測(cè)報(bào)告 •全程實(shí)驗(yàn)報(bào)告 |